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影響熒光原位雜交實驗的因素有哪些？

熒光原位雜交是一門新興的分子細胞遺傳學(xué)技術(shù)，是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。那么影響熒光原位雜交實驗的因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、固定液的選擇及固定時間①石蠟組織建議用10%中性緩沖福爾馬林固定12～48h，其它固定液對實驗結(jié)果可能產(chǎn)生一定的影響。②組織標本離體后應(yīng)盡快固定，較大標本切開固定。如樣本固定不及時，熒光信號會減弱。（尤其環(huán)境溫度較高時更應(yīng)及時固定）③固定液體積應(yīng)不少于標本體積的10倍，否則固定不...

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流式細胞周期檢測的常見問題有哪些？

你知道流式細胞周期檢測的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、樣本制備注意事項1.根據(jù)不同的檢測細胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無菌的環(huán)境培養(yǎng)。2.培養(yǎng)細胞時，以對數(shù)期處理為宜，避免細胞量過少導(dǎo)致收集細胞量不足或者細胞量過多導(dǎo)致細胞開始大量死亡造成的實驗誤差。3.流式檢測細胞周期上機檢測所需收集細胞量較多，收集細胞時盡量多收集一些4.流式檢測對細胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動作輕緩，避免過多地損傷、弄破細胞。5.本實驗對細胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動作...

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【干貨】一文了解vero細胞培養(yǎng)全流程

Vero細胞系是連續(xù)非整倍體細胞，連續(xù)細胞系可以經(jīng)過多次分裂而不衰老，非整倍體是指細胞中的染色體數(shù)目與通常的不同。與其它普通哺乳動物細胞不同，Vero細胞還有干擾素分泌缺陷的特點，當被病毒感染時，它不能分泌干擾素，但它仍然具有α/β-干擾素的受體，所以對于其它來源的干擾素仍有正常的反應(yīng)。一、基本信息細胞名稱：Vero非洲綠猴腎細胞細胞別稱：VERO;Verdareno細胞形態(tài)：上皮細胞樣生長特性：貼壁生長組織來源：正常腎培養(yǎng)基：MEM+10%FBS+1%PS生長條件：①氣相：...

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原代細胞培養(yǎng)的分離注意事項有什么？

分離是原代細胞培養(yǎng)的重要步驟之一，那么你知道原代細胞培養(yǎng)的分離注意事項有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、組織塊培養(yǎng)法1.組織塊接種后的前3天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2.加入的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3.當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細胞的生長。4.為促進組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，可以在種植前...

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原代細胞取材的注意事項有哪些？

取材作為原代細胞培養(yǎng)過程中至關(guān)重要的一步，那么原代細胞取材的注意事項有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、皮膚和粘膜主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。二、內(nèi)臟和實體瘤1.無菌環(huán)境；2.熟悉所需組織的類型和部位；3.要避開破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。三、血液細胞一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細胞，取材時應(yīng)注意抗凝。四、骨髓、羊水、胸/腹水細胞嚴格無菌，注意抗凝，還要盡快分離培養(yǎng)，離心后，用無鈣、鎂PBS洗兩次，再...

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